По дефиницији, пребиотици треба да стимулишу раст ограниченог броја бактерија, што доводи до промена у равнотежи микробиоте у дебелом цреву. Стационарна шаржна култура људских бактерија показала је да фруктоолигосахариди (ФОС), галакто{0}}олигосахариди (ГОС), ксило{1}}олигосахариди (КСОС), изомалт-олигосахариди (ИМО) и лактулоза могу мењају микробиоту, повећавају бифидобактерије и/или бактерије млечне киселине, док се Цлостридиум и Бацтероидетес смањују. Ефикасна су три олигосахарида, којих има у Европи у изобиљу: ФОС (укључујући инулин), транс-ГОС и лактулозу. Пребиотички ефекти ФОС-а и лактулозе су демонстрирани у експериментима на људима коришћењем метода на молекуларном-нивоу. Додавање ФОС-а у кексе и другу храну, израчунато на 8 г дневно, такође је показало велику ефикасност.
Према методама испитивања постојеће литературе, већина индикатора који се користе за процену дејства пребиотика су: ефекат пролиферације на корисне бактерије (као што су бифидобактерије, лактобацили); инхибиција и потенцијалне патогене бактерије (као што је Цлостридиум) на штетне бактерије. Не-пролиферативни ефекат бактерија (као што су Есцхерицхиа цоли, Ентероцоццус, Бацтероидес, итд.); производњу киселине и гаса након метаболизма цревном флором. Пребиотици са различитим функционалним олигосахаридима (изомалт олигосахариди (ИМО), фруктоолигосахариди (ФОС), галактоолигосахариди (ГОС) који се обично налазе на тржишту)
1. Ефекат пролиферације бифидобактерија
Уопштено говорећи, у цревима постоји 8 врста бифидобактерија, међу којима су најзаступљеније Бифидобацтериум бифидум, Бифидобацтериум инфантис, Бифидобацтериум адолесцентис, Бифидобацтериум лонгум и Бифидобацтериум бреве. Састав и удео бифидобактерије у цревима људи различите старости се у одређеној мери разликују. На пример, код деце, Бифидобацтериум инфантис, Бифидобацтериум бифидум и Бифидобацтериум лонгум се углавном налазе у цревном тракту младих одраслих и старијих особа. Бифидобацтериум адолесцентис и Бифидобацтериум лонгум. Са старењем, односно утицајем лоших навика у исхрани и болести, вероватно ће доћи до значајног пада броја и удела бифидобактерија у цревима, што не утиче на очување здравља људи.
Бројне студије су респективно потврдиле да изомалтоолигосахариди, фруктоолигосахариди, галакто-олигосахариди, ксило-олигосахариди итд. имају очигледне ефекте на пролиферацију бифидобактерија. Студија ферментације ин витро коју су спровели Риерофи ет ал. показало је да седам олигосахарида могу значајно да пролиферишу бифидобактерије, али је степен пролиферације мало другачији (види слику 1). Конкретно, доступност и употреба различитих олигосахарида од стране пет врста Бифидобацтериум у цревима је такође варирала (видети табелу 1).
Студија Цлаире ет ал. показала је да су галактоолигосахариди и изомалтоолигосахариди пребиотици које различите бифидобактерије могу добро искористити и да имају високу стопу пролиферације, али на ове друге утичу Бифидобацтериум лонгум и Бифидобацтериум адолесцентис. Већа искоришћеност. Поред доступности ксило{0}}олигосахарида од стране Бифидобацтериум адолесцентис и Бифидобацтериум лонгум, доступност других бифидобактерија је лоша. Стога су галактоолигосахариди и изомалтоолигосахариди пребиотици погодни за људе свих узраста.